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2025-03-24
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詳細(xì)介紹下植物細(xì)胞的培養(yǎng)方法2
發(fā)表時(shí)間：2021-08-17 16:24 目前，植物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)還存在長期培養(yǎng)、易受污染、細(xì)胞數(shù)量增多凝集形成大團(tuán)塊、制造成本高等諸多問題。今后，隨著反應(yīng)器結(jié)構(gòu)和工藝的進(jìn)一步優(yōu)化，這些問題應(yīng)當(dāng)會(huì)得以解決，細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)也將會(huì)發(fā)揮它更大的作用。
?、僦苽渲参飭渭?xì)胞的方法通常包括機(jī)械法、酶法和愈傷組織誘導(dǎo)法。 機(jī)械法主要是通過機(jī)械研磨獲得游離的單細(xì)胞。這種方法得到的細(xì)胞數(shù)量少，效率低，所以目前一般不采用這種方法生產(chǎn)。 酶法是目前獲得單細(xì)胞有效、常用的方法。由于植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此可以利用某些水解酶如纖維素酶和果膠酶解離葉片，釋放游離的單細(xì)胞。 愈傷組織是指一組不規(guī)則、同質(zhì)的細(xì)胞群，它們是母體植物的一部分，已接種到特定培養(yǎng)基中并從傷口培養(yǎng)一段時(shí)間。由于愈傷組織內(nèi)細(xì)胞之間的連接相對(duì)松散，因此也可以通過愈傷組織的液體懸浮和搖動(dòng)培養(yǎng)獲得單個(gè)細(xì)胞。 ?、诩?xì)胞培養(yǎng) 用于植物單細(xì)胞培養(yǎng)的方法包括護(hù)理培養(yǎng)、微室培養(yǎng)和平板培養(yǎng)。護(hù)理培養(yǎng)是一種利用活躍生長的愈傷組織來監(jiān)測和保護(hù)單個(gè)細(xì)胞，使其能夠生長和增殖的方法。具體方法是將愈傷組織注入裝有培養(yǎng)基(培養(yǎng)基主要成分為無機(jī)鹽、氨基酸、維生素、糖類、植物生長調(diào)節(jié)劑、蒸餾水、瓊脂等，pH 5.8)的無菌三角中。將無菌濾紙放入瓶中，濾紙上接種單細(xì)胞，密封后置于恒溫培養(yǎng)箱中，25℃±2℃培養(yǎng)。這種方式培養(yǎng)的細(xì)胞容易存活，但不便于顯微鏡觀察。 |
