關(guān)于原代細(xì)胞的傳代培養(yǎng)應(yīng)該怎么做

　　原代細(xì)胞是稱為原代細(xì)胞的細(xì)胞，其通過(guò)諸如蛋白酶的方法從身體組織(人類組織，小鼠組織，大鼠組織，兔組織等)獲得，并在體外培養(yǎng)以模擬人體。

　　通常，將經(jīng)過(guò)1代培養(yǎng)的原代細(xì)胞和遺傳多到10代的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。我們對(duì)諸如細(xì)胞生命過(guò)程，細(xì)胞致癌作用和細(xì)胞工程學(xué)等問(wèn)題進(jìn)行研究，在這些問(wèn)題中，一次電池可以在人工條件下存活，生長(zhǎng)，增殖和遺傳。

　　那么原代細(xì)胞的繼代培養(yǎng)應(yīng)該怎么做呢?一般有以下兩種方法：

　　一、貼壁細(xì)胞的消化法傳代

　　1、吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。

　　2.加入約1 ml的消化液(與胰蛋白酶或EDTA混合)，然后輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶，以使培養(yǎng)瓶底部的細(xì)胞浸入溶液中。

　　3.消化2-5分鐘后，將培養(yǎng)瓶放在顯微鏡下觀察。原始的貼壁細(xì)胞趨向于逐漸變圓。如果尚未漂浮，棄去消化液，加入培養(yǎng)液終止消化。

　　4.用移液管將粘附的細(xì)胞吹入懸浮液，分別接種2-3個(gè)培養(yǎng)瓶，并置于37°C的培養(yǎng)箱中以繼續(xù)培養(yǎng)。第二天，觀察粘合劑的生長(zhǎng)。

　　二、懸浮細(xì)胞的傳代

　　1、直接傳代

　?、俾恋沓銎康椎母〖?xì)胞后，吸出上清液1 / 2-2 / 3。

　?、?通過(guò)移液形成細(xì)胞懸液后，將其接種到另一個(gè)2-3個(gè)培養(yǎng)瓶中，并放入37°C的培養(yǎng)箱中。

　　2、離心法傳代

　?、?將細(xì)胞與培養(yǎng)基一起轉(zhuǎn)移至離心管中，并以800-1000 rpm離心5分鐘。

　?、?除去上清液，向離心管中添加新培養(yǎng)基，并用移液管吹干以形成細(xì)胞懸液。

　?、蹖⒓?xì)胞懸液接種到另一個(gè)2-3個(gè)培養(yǎng)瓶中，并置于37°C的培養(yǎng)箱中。